Pirmsimplantācijas ģenētiskās diagnostikas metodi izmanto, lai novērtētu embrija veselības stāvokli, kas iegūts ar in vitro apaugļošanu pirms implantācijas dzemdes dobumā. Metode ļauj ne tikai izvēlēties veselīgu nākotnes mazuli, bet arī palielināt grūtniecības iespējamību. Šo paņēmienu plaši izmanto visās pasaules klīnikās, kas nodarbojas ar in vitro apaugļošanu.
Vispārīgi jēdzieni
Ģenētiskā diagnoze pirms implantācijas ļauj veikt visaptverošu izmeklēšanu un izslēgt hromosomu anomāliju klātbūtni kopumā vai kādu konkrētu novirzi. Pēdējā laikā paralēli agrīniem defektiem tiek pārbaudīti gēni, kas var provocēt audzēju rašanos pieaugušā vecumā (olnīcas, zarnas, krūtis).
Genomisko slimību pārnēsātāja gadījumā no mātes puses jau pirms apaugļošanas tiek veikta vairāku olšūnas polāro ķermeņu biopsija. Aprakstītās metodes ir alternatīva agrīnai pirmsdzemdību diagnostikai, kas ļauj brīdināt par abortu, ja auglim pēkšņi ir ģenētiskas patoloģijas.
Pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnostika ļauj noteikt topošā mazuļa dzimumu jau skrīninga procesā. To izmanto, lai novērstu ar dzimumu saistītu anomāliju attīstību.
Kā ģenētiskās slimības tiek pārmantotas
Atšķiriet iedzimtas patoloģijas, kas radušās pēc dominējošā, recesīvā un ar x saistītā tipa.
| Mantojuma veids | Funkcijas | Slims bērna piedzimšanas risks |
| Dominants | Vienam no partneriem ir viens bojāts gēns, kas dominē viņu pārī | 50% manto gēnu |
| Recesīvs | Abiem partneriem ir viens un tas pats bojāts gēns, bet tiem ir normāls pāris | 50% kļūst par nesēju, 25% saslimst ar slimību |
| saistīts ar X | Sievietes no patoloģijām aizsargā hromosomu komplekts, un tās ir tikai nesējas. Vīriešiem ir raksturīga anomālijas attīstība | vīrietim ir 50% iespēja mantot gēnu un slimību, sievietei ir iespēja kļūt par nēsātāju kā viņas mātei - 50% |
Kas tiek pārbaudīts?
Pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnostika (PGD) tiek veikta šādos gadījumos:
- Viena vai abu pārmantoto slimību klātbūtne vai kariotipa izmaiņas. Bieži vien paši partnerizina par savām problēmām, retāk uzzina skrīninga procesā.
- Atkārtots spontāns aborts. Problēma nav vecāku anomālijās (tās var nebūt vispār), bet gan augļa ģenētiskajās mutācijās, kas izraisa spontānu abortu.
- Personu vecums, kas piedalās IVF programmā, ir vecāks par 38 gadiem.
- Vairāk nekā 3 neveiksmīgu IVF mēģinājumu vēsture.
- Vīriešu neauglība.
- ICSI (intracitoplazmas spermas injekcijas) iekļaušana apaugļošanas programmā. Process ir pilns ar ģenētisku anomāliju attīstību embrijā.
- Hydatidiform mola vēsture.
PGD funkcijas
Pētījumi preimplantācijas ģenētiskās diagnostikas jomā liecina, ka metodei ir tiesības pastāvēt, tā palīdz diagnosticēt un novērst hromosomu anomālijas, tomēr nepieciešama turpmāka uzlabošana.
PGD funkcijas ir šādas:
- Aborts ar skrīningu ir mazāks nekā bez skrīninga;
- pašlaik nav pierādījumu, kas palielinātu grūtniecības iespējamību;
- iespējams nepatiess rezultāts: embrijs ir vesels, bet rezultāts uzrāda novirzes, embrijs ir slims, bet pētījums saka pretējo (5-10% gadījumu).
Pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnoze (blastomēra izmeklēšana)
Pēc vienošanās par in vitro apaugļošanu reproduktīvā speciāliste izvērtē nepieciešamībuPGD precētam pārim. Ja norādīts, partneri var vienoties vai atteikt procedūru. Pēc tam tiek parakstīts dokuments, kas apstiprina atļauju veikt aptauju.
Trešajā dienā pēc embrija apaugļošanas ģenētiķis analīzei paņem vienu no izveidotajām blastomēra šūnām. Tiek uzskatīts, ka tas neietekmē augli, jo visas šūnas ir savstarpēji aizvietojamas.
Speciālists veic pētījumus vienā no iepriekš izvēlētajām jomām: šūnas struktūras izpēte speciālā fluorescējošā mikroskopā, DNS testēšana, izmantojot polimerāzes ķēdes reakcijas metodi, lai noteiktu mutācijas klātbūtni.
Pamatojoties uz rezultātu, implantācijas procesā netiks izmantoti embriji ar novirzēm. Atlasīts veselīgs un kvalitatīvs. Pēc tam viens vai vairāki no tiem tiek pārnesti uz mātes dzemdi.
Kad notiek polārā ķermeņa biopsija, tiek pārbaudīts mātes hromosomu komplekts. To veic gadījumā, ja sievietes līnijā tiek atklāta ģenētiski noteiktas patoloģijas klātbūtne. Procedūra ļauj noteikt, vai olšūna ir vesela, kas tiks izmantota apaugļošanai, nepārkāpjot tās struktūru. Ja anomālijas netiek konstatētas, tad to var izmantot apaugļošanai un pārnesei uz dzemdes dobumu.
Ir gadījumi, kad tiek pārmeklēti polārie ķermeņi un pēc tam blastomēri. Tas ļauj iegūt ticamāku rezultātu. Shēmu, pēc kuras tiks veikta pārbaude, izvēlas speciālistsģenētiķis.
Izmantotās metodes
Hromosomu skaitliskās un strukturālās anomālijas nosaka ar fluorescējošās hibridizācijas metodi. Šī metode ļauj norādīt šūnas DNS secību. Tiek izmantotas īpašas DNS zondes, kas savā struktūrā ir komplementāras vietas blastomēru DNS zonām.
Zonde satur nukleotīdu un fluoroforu (molekulu, kas spēj fluorescenci). Pēc mērķa DNS mijiedarbības ar DNS zondi veidojas izgaismoti laukumi, kas tiek aplūkoti fluorescējošā mikroskopā.
Izmantojiet arī PCR metodi (polimerāzes ķēdes reakciju). Tas sastāv no DNS daļas kopēšanas, izmantojot fermentus noteiktos laboratorijas apstākļos.
Aneuploidijas diagnoze
Šī ir viena no pirmsimplantācijas ģenētiskās diagnostikas metodēm, kas ļauj noteikt skaitlisku hromosomu anomāliju esamību (identificēt papildu vai trūkstošās hromosomas).
Ģenētiskais materiāls sastāv no 46 hromosomām, no kurām pusi dod tēvs, bet otru pusi māte. Ja embrijs saņem papildu hromosomu, to sauc par trisomiju, un jebkura zaudēšanu sauc par monosomiju. Šo defektu rezultātā var rasties:
- embrija implantācijas trūkums;
- spontāns aborts;
- iedzimtas patoloģijas (Dauna sindroms, Klīnfeltera, Šereševska-Tērnera sindroms).
Vīriešu neauglība un pāra vecumsir bieži faktori šādu anomāliju attīstībā.
monogēnu patoloģiju PGD
Embriju pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnostika, lai noteiktu monogēno slimību klātbūtni, tiek veikta ģimenēs, kurās konstatēta iedzimtu anomāliju klātbūtne. Ja pārim jau ir mazulis ar viendabīgu slimību, tad iespēja laist pasaulē vēl vienu slimu bērniņu palielinās vairākas reizes.
Cēlonis ir hromosomu secības pārkāpums noteiktā DNS sadaļā. Šīs slimības ietver:
- cistiskā fibroze;
- adrenogenitālais sindroms;
- fenilketonūrija;
- hemofilija;
- sirpjveida šūnu anēmija;
- Verniga-Hofmana sindroms.
Metodes ieguvumi un riski
Pirmsimplantācijas ģenētiskajai diagnozei, kas tiek uzskatīta par neskaidru, ir noteiktas priekšrocības pirmsdzemdību skrīninga jomā:
- dzemdē tiek pārnesti tikai kvalitatīvi un veseli embriji;
- samazina risku piedzimt bērnam ar ģenētiskām novirzēm;
- uz pusi samaziniet spontāna aborta risku;
- uz pusi samazina daudzaugļu grūtniecības risku;
- 10% lielāka embrija implantācijas iespēja;
- 20% lielāka iespēja veiksmīgai bērna piedzimšanai.
Netīša embrija bojājuma risks PGD laikā ir 1%. Kļūdaina rezultāta iespējamība ir 1:10, turklāt 3% iespēja, ka embrijs ar jebkādām anomālijām tiks atzīts par veselīgu.
Varbūtība, ka būs vesels embrijsnovirzes - 1:10. 1:5 iespēja, ka embriju pārvietošana dzemdes dobumā tiks atcelta, jo katrā no tiem konstatētas anomālijas.
Kontrindikācijas
Pirmsimplantācijas ģenētiskajai diagnozei (PGD), kuras sekas uz embriju nav skaidri noteiktas, ir vairākas kontrindikācijas, kas jāveic:
- embrija sadrumstalotība vairāk nekā 30% (fragmentu veidošanās līdz 25% tiek uzskatīta par normu);
- daudzkodolu blastomēru klātbūtne embrijā;
- embrijam trešajā attīstības dienā ir mazāk par 6 blastomēriem.
Metodes drošība
Diagnoze tiek veikta agrīnā nākotnes organisma radīšanas stadijā, kad visas tā šūnas ir pluripotentas, tas ir, no katras var veidoties pilnvērtīgs vesels organisms.
Visas notiekošās PGD darbības nerada laiku embrijam, auglim un nedzimušam bērnam. Pēc pētījuma parauga saņemšanas tas tiek sagatavots īpašā veidā. Šūnas novieto uz stikla priekšmetstikliņa, uz kura tās ir nostiprinātas, vai buferšķīdumā.
Procedūras izmaksas
Pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnostika, kuras izmaksas svārstās no 50 līdz 120 tūkstošiem rubļu, no pirmā acu uzmetiena šķiet dārga manipulācija. Taču bērna ar ģenētiski noteiktām patoloģijām veselība un ārstēšana izmaksās daudz dārgāk.
Procedūra sniedz visas priekšrocības salīdzinājumā ar sievietēm, kuras varēja ieņemt bērnu dabiskiveidā, jo šāda diagnostikas metode viņiem nav pieejama. Pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnostika, kuras cena salīdzinājumā ar pašu in vitro apaugļošanu ir niecīga, kalpo tikai kā papildinājums vispārējai programmai, kas ļauj ne tikai izturēt un dzemdēt, bet arī izaudzināt veselu mazuli.
