Rakstā apsveriet, kas tas ir - PCR diagnostika? Cilvēka papilomas vīruss (HPV) mūsdienās ir ļoti izplatīta slimība, kas notiek hroniskā formā un ir pilns ar biežiem recidīviem. Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR) ir vismodernākā papilomas vīrusa diagnostikas metode. Šī metode tiek uzskatīta par ļoti uzticamu un palīdz identificēt ne tikai šī vīrusa klātbūtni cilvēka organismā, bet arī tā daudzumu un daudzveidību. HPV PCR analīze ir jutīga pat pret neaktīvām vīrusa formām, kurām nav ārēju izpausmju dzimumorgānu kondilomu un papilomu veidā.
Uz kāda ir metodes pamatā?
Pamatojoties uz pacienta DNS izpēti, lai noteiktu svešķermeņu klātbūtni šajā ķēdē. Tas sastāv no četriem nukleotīdiem, kas ir sakārtoti noteiktā secībā. Ja vīruss nonāk organismā, šajā ķēdē notiek izmaiņas kārtībā, kas ļauj rūpīgi uzraudzīt pat visniecīgāko svešo daļiņu darbību. HPV PCR izpētes tehnika tiek veikta, izmantojot vīrusu daļiņas, kas nosaka šūnu dalīšanās ātrumu.
Kas nosaka pētniecību?
Šis diagnostikas princips ļauj izsekot HPV aktivitātei ne tikai tad, kad tā ir pasīvā stāvoklī, bet arī inkubācijas periodā. PCR diagnostika nosaka:
- HPV klātbūtne organismā;
- celmi, kas inficē pacientu;
- kvantitatīvs saturs organismā.
Papilomas vīruss inficēja lielāko daļu cilvēku, taču spēcīga imūnaizsardzība nomāc tā izpausmes un neļauj savairoties. Tādējādi HPV noteikšana kvalitatīvā veidā ne vienmēr ir attaisnojama, jo nav racionāli, ja organismā atrodas vīrusa daļiņas, bet to ietekme ir tik minimāla, ka cilvēkam tas nekādi nekaitē. Kvalitatīva analīze uzrāda pozitīvu rezultātu, un tas bieži vien mulsina cilvēku.
Kvantitatīvā metode
Tādēļ diagnostikai visbiežāk tiek izmantota kvantitatīvā metode, kas ļauj izsekot vīrusu izraisītāju skaitam organismā un noteikt, cik bīstama ir to darbība. Turklāt ir svarīgi noteikt HPV celmu daudzveidību. Tos iedala pēc onkogenitātes pakāpes: daži var kļūt par galveno onkoloģisko slimību rašanās faktoru, savukārt citi ir absolūti droši un var radīt tikai dažas kosmētiskas problēmas.
Katrai individuālai situācijai nepieciešama individuāla pieeja,tādēļ pirms šīs laboratoriskās pārbaudes vēlams konsultēties ar kvalificētu speciālistu, kurš pastāstīs, kā un kādus celmus būtu vislabāk pārbaudīt, ņemot vērā pacienta stāvokli un klīniskos simptomus.
Vadīšanas indikācijas
Visnozīmīgākais iemesls, lai veiktu PCR testu attiecībā uz HPV, ir kārpu klātbūtne uz ķermeņa.
Inficēšanās ar šo vīrusu iespējama tikai no cilvēka. Pēc iekļūšanas asinsritē patogēnais mikroorganisms sāk vairoties ādas augšējos slāņos, kas izraisa raksturīgu izpausmju attīstību - kondilomu vai papilomu veidošanos. Tā kā šī slimība ir diezgan izplatīta un sastopama gandrīz 80% iedzīvotāju, iespēja saslimt ar to ir ārkārtīgi augsta. Papilomas vīrusi tiek pārnesti caur:
- neaizsargāts dzimumakts;
- skūpstoties;
- dzemdējot bērnu no mammas;
- sadzīves veidā;
- ar ciešu ādas kontaktu.
Galvenās indikācijas asins analīzei un PCR uztriepei HPV noteikšanai ir šīs slimības ādas simptomi, kas izskatās kā nokarenas kārpas uz diega līdzīga plāna kātiņa. Pat ja šādas kondilomas uz ādas netiek novērotas, vīruss joprojām var būt asinīs, taču tā norise būs asimptomātiska. Ja pacientam tiek konstatētas 18. un 16. apakštipa papilomas vīrusa infekcijas, viņam ieteicams regulāri pārbaudīties pie tādiem speciālistiem kā ginekologs un urologs, veikt diagnostiskās procedūras un veikt HPV pārbaudi, joTikai ar savlaicīgu diagnostiku ir iespējams novērst noteiktu vēža veidu attīstību.
Paņēmienu veidi
HPV PCR diagnostikas ietvaros ir izstrādātas četras galvenās pārbaudes metodes, no kurām katrai ir dažas specifiskas pazīmes un tās tiek noteiktas, ņemot vērā slimā cilvēka stāvokli. Lai izvēlētos labāko metodi, ir nepieciešama speciālistu konsultācija. Tātad, četras metodes:
- Kvalitatīva metode, ko izmanto, lai atspēkotu vai apstiprinātu vīrusa klātbūtni organismā. Tās galvenais trūkums ir nespēja noteikt HPV celma veidu (tikai 14-21 tips). Visbiežāk vienlaikus ar citām papilomas vīrusa noteikšanas metodēm tiek izmantota kvalitatīva metode. Rezultāts tiek ziņots, izmantojot divus vērtējumus: "nav atrasts" vai "konstatēts". Tas nozīmē, ka šis paņēmiens vai nu norāda uz svešas DNS klātbūtni, vai arī norāda uz tās neesamību.
- Genotipēšana ir metode, kas var noteikt vīrusa klātbūtni cilvēka organismā un noteikt tā dažādību. Šo metodi izmanto gadījumos, kad nepieciešams noskaidrot, vai pēc ārstēšanas saglabājas vīrusa DNS, vai arī tiek novērots recidīvs jaunas infekcijas rezultātā. Genotipa noteikšana palīdz novērtēt terapijas efektivitāti, nosakot HPV veidu. Ja tas ir tas pats celms, ar kuru pacients tika ārstēts, tad ārstēšana bija neveiksmīga. Ja analīze parāda cita veida HPV klātbūtni, tas var norādītatkārtota inficēšanās.
- Kombinētā metode, kas ir ļoti specializēta diagnostikas metode, kuras pamatā ir kvalitatīva un 16 celmu noteikšanas kombinācija, izmantojot genotipēšanu. Rezultātu var attēlot ar 3 atbildēm: “atklāts celms 16”, “nav konstatēts” un “konstatēts HPV tips 16 ieskaitot”. Šo metodi izmanto, ja jums ir aizdomas par papilomas vīrusa veidu, kas var izraisīt dzemdes kakla vēzi sievietēm.
- Kvantitatīvā PCR metode augsta onkogēna riska HPV, kas ļauj noteikt vīrusa līmeni asinīs un izsekot tā attīstībai. To uzskata par visinformatīvāko, jo tas ļauj noteikt patoloģiskā procesa smagumu, pamatojoties uz kuru tiek izvēlēta pareizā ārstēšana. Metode ir balstīta uz vīrusu šūnu skaita noteikšanu pētītajos 100 tūkstošos. Ja to kopējais skaits pārsniedz 5, tas norāda uz augstu papilomas vīrusa koncentrāciju organismā, kas palielina vēža šūnu iespējamību. Ja summa ir mazāka par 3, koncentrācija tiek uzskatīta par nenozīmīgu.
Kā sagatavoties un kārtot testu?
Asinis var ņemt kā HPV biomateriālu, bet vīriešiem visbiežāk tiek ņemti izdalījumi no urīnizvadkanāla un sievietēm no dzemdes kakla.
Īpaša sagatavošana PCR HPV noteikšanai nav nepieciešama. Galvenais nosacījums ir neurinēt dažas stundas pirms procedūras. Turklāt 2-3 dienas pirms pētījuma ir vēlams atturēties no dzimumakta un nēdzert alkoholiskos dzērienus. Tajā pašā laikā neaizmirstiet par intīmās higiēnas procedūrām.
Vīriešiem
Vīrieši ņem tamponu – dzimumlocekļa galvu un urīnizvadkanālu apstrādā ar fizioloģisko šķīdumu. Speciālists izmanto speciālu otu, kuru ievada urīnizvadkanālā apmēram 4 cm.. Ar nelielu rotāciju savāc bioloģisko materiālu, ievieto mēģenē un nosūta uz laboratoriju izpētei. Tajā pašā laikā jūs varat to uzglabāt ne ilgāk kā 2 dienas no savākšanas brīža.
Sievietes
Smērēšanu PCR analīzei uz HPV sievietēm veic šādi: uz dzemdes kakla uzklāj sterilu šķīdumu, pēc tam ar otu no dzemdes kakla kanāla paņem tamponu. Ierīce tiek ievietota aptuveni 1 cm dziļumā, pēc tam ārsts ar rotācijas kustībām noskrāpē kanāla sienas. Bioloģiskais materiāls tiek ievietots speciālā mēģenē, kur tas paliek apmēram 15 sekundes. Tajā speciālists to noslauka pret sienām un pēc tam izņem. Pēc tam mēģenes saturs tiek nosūtīts laboratoriskai pārbaudei.
Pareiza materiāla paraugu ņemšana pētniecībai ir veiksmīgas diagnostikas un uzticama rezultāta iegūšanas atslēga. Ja tajā pašā laikā tiek pārkāpta sterilitāte un svešķermeņi iekļūst mēģenē, analīzes laikā var atpazīt vīrusu, kura patiesībā nav pacienta ķermenī. Kļūda var rasties arī tāpēc, ka izpētei ņemts mazs materiāls.
Kur ņemt PCR HPV, daudzi cilvēki ir ieinteresēti. Pārbaudes var veikt jebkurā medicīnas iestādēklīnikā vai laboratorijā, piemēram, "Invitro" vai "Hemotest".
Metodes priekšrocības
PCR ir viena no galvenajām diagnostikas metodēm un šobrīd joprojām ir vispopulārākā ārstu vidū. Šis pētījums tiek veikts ne tikai HPV noteikšanai, bet arī ļauj atklāt citus patoloģiskus mikroorganismus, kas var tikt pārnesti seksuāla kontakta ceļā. Šāda analīze palīdz diagnosticēt slēptās infekcijas, hepatītu utt. PCR testam HPV noteikšanai ir vairākas priekšrocības salīdzinājumā ar citām slimību noteikšanas metodēm. Šīs priekšrocības ir:
- Augsta specifika. Analīze palīdz ar lielu varbūtību atdalīt svešas DNS pēdas, pētot savākto biomateriālu.
- Augsta veiktspēja. PCR pētījums ir automatizēts process, kas palīdz veikt pētījumu tieši analīzes dienā. Šis ātrums ļauj cilvēkam ilgstoši neuztraukties par rezultātiem un iegūt to rokās dažu dienu laikā.
- Augsta jutība. Testēšana ļauj izpētīt vīrusu aktivitāti pat inkubācijas periodā, kad to koncentrācija ir ļoti zema. Tas palīdz novērst patoloģiska procesa rašanos un laicīgi uzsākt terapiju.
- Iespēja veikt vairākas analīzes vienlaikus. Pamatojoties uz vienu asins paraugu, var veikt diagnostiku, lai noteiktu vairākas slimības vienlaikus. Piemēram, jūs varat vienlaikuslai identificētu gonorejas un hlamīdiju izraisītāju. Tajā pašā laikā šī procedūra nevarēs negatīvi ietekmēt rezultāta ticamību.
Pētījuma trūkumi
Neskatoties uz šīs analīzes lielo popularitāti un informatīvumu, HPV PCR diagnostikai ir daži negatīvi aspekti. Galvenais no tiem ir viltus pozitīvu rezultātu iespējamība. Tas notiek, kad terapija jau ir veikta, infekcija ir iznīcināta, bet mirušās vīrusu šūnas joprojām saglabājas ķermeņa audos. Šūnu atjaunošana aizņem kādu laiku. Ja veicat pētījumu agrāk nekā 2-3 mēnešus pēc ārstēšanas, PCR var uzrādīt pozitīvu rezultātu. Tehnika nepamana nekādas atšķirības, jo tā ir vērsta uz vīrusa DNS meklēšanu, ko var atrast pat jau mirušās šūnās. Tas veicina viltus pozitīvus rezultātus. No šīs situācijas var izvairīties, ja laboratoriskais izmeklējums tiek veikts ārstējošā ārsta noteiktajā termiņā.
Transkripts
Ko parādīs PCR atšifrēšana HPV gadījumā?
Ārstam ir jāinterpretē testa rezultāti. Bet ir arī svarīgi, lai pacients būtu informēts par rezultātu lapas struktūru. Ja analīze norāda uz “DNS nav konstatēta”, tad asinīs nav papilomas vīrusa. Ja Lg indikators ir 5 vai vairāk, tas norāda uz tā augsto koncentrāciju asinīs, Lg 3-5 - ievērojamu daudzumu, mazāk par 3 - nenozīmīgu daudzumu.
Kļūdaini negatīva analīze
Arīvar rasties kļūdaini negatīva analīze. Tas notiek, ja:
- savāktais bioloģiskais materiāls tika nepareizi uzglabāts vai transportēts;
- tika pārkāpti sterili apstākļi, un saņemtajās pacienta asinīs nokļuva citi mikroorganismi;
- reaģentu nepiemērotības dēļ.
Lai novērstu viltus negatīvu rezultātu iespējamību, šai analīzei ir jāizvēlas apstiprināta laboratorija ar augsti kvalificētu personālu.
Mēs detalizēti izpētījām, kā un kāpēc tiek veikta PCR diagnostika. Kas tas ir, tagad ir skaidrs.
