Kas ir bakterioloģiskā izpēte? Pēc kādas shēmas tas tiek veikts? Kas šajā gadījumā ir domāts ar drošību? Kādi ir bakterioloģisko pētījumu mērķi un posmi?
Vispārīga informācija
Bakterioloģiskā izmeklēšana ir zinātnisks process, kurā tiek identificētas baktērijas un pētītas to īpašības, lai veiktu mikrobioloģisko diagnozi. Šeit liela nozīme ir iegūtā mikroorganisma veida vai sugas noteikšanai (tiek domāta tīrkultūra). To papildina organismu bioķīmisko un fizioloģisko īpašību, kā arī toksīnu veidošanās tendences izpēte. Šiem nolūkiem tiek izmantotas izgulsnēšanās un aglutinācijas reakcijas. Tiek praktizēta arī laboratorijas dzīvnieku inficēšana, pēc tam atklājot patoloģiskas izmaiņas.
Darbs ar testa materiālu
Bakterioloģiskā pētījuma algoritms paredz stingru īpašu norādījumu ievērošanu. Tādējādi testa materiāls ir jāsavāc sterilos traukos aseptiskos apstākļos. Ir arī jārūpējasnodrošināt pēc iespējas ātrāku nogādāšanu laboratorijā. Vēlama paraugu uzglabāšana aukstumā. Bakterioloģiskās izpētes tehnika paredz daudzas iespējamās situācijas. Tādējādi objekta veids, mikroorganisma īpašības un slimības raksturs bieži vien liek izstrādāt individuālus norādījumus darbam. Darbā tiek izmantots liels skaits dažādu metožu. Viena no visizplatītākajām ir bakterioskopija. Bet, ja baktērijas nav fiksētas, tad tiek izmantots sasmalcināts vai piekārts piliens. Jāņem vērā, ka pēdējām divām iespējām ir raksturīgs paaugstināts lipīguma līmenis.
Bakterioskopija
Šajā gadījumā tiek izmantoti sitieni. Lai tos izveidotu, jums ir jāsadala pētāmā šķidruma piliens pa stikla priekšmetstikliņa virsmu. Zatesam vajadzētu to izžāvēt. To bieži dara, pārvietojot zāles caur liesmu, kas iegūta no gāzes degļa. Lai gan kā alternatīvu var izmantot fiksējošus savienojumus. Lai norādītu, ka ar šo preparātu ir veiktas sagatavošanas darbības, tas ir iekrāsots. Šādas manipulācijas mērķis ir precizitāte, kas ir ļoti svarīga, veicot mikroskopisko un bakterioloģisko izmeklēšanu. Galu galā, ja jūs atkārtoti lietojat zāles citam mērķim, jūs saņemsiet putru, ar kuru būs ļoti grūti efektīvi strādāt.
Kāpēc bakterioskopija ir tik populāra
Šīs metodes pieejamības dēļ. Ja tiek veikts svaiga preparāta bakterioloģiskais pētījums, tad, lai noteiktu patogēnuvar izmantot mikroķīmiskas reakcijas vai dažādu mikroorganisma strukturālo daļu selektīvu krāsošanu. Kurš ir labāks? Precīzāku rezultātu var iegūt, strādājot ar krāsainu preparātu. Šajā gadījumā testa materiāls tiek uzklāts uz iepriekš sagatavota stikla priekšmetstikliņa. Un noteikti plānojiet (un, ja iespējams, vienmērīgu) slāni. Pēc tam jums jāgaida, līdz zāles izžūst gaisā. Pēc tam mikroorganismi tiek fiksēti, izmantojot kādu no parastajām metodēm. Pēc tam atdzesētais preparāts tiek krāsots ar diferenciālo vai vienkāršu krāsu. Šim nolūkam var izmantot sausus un vietējos preparātus. Pēc tam atliek virzīt ultravioletos vai īsos zilos starus uz organismu uzkrāšanās vietu, kas liek mirdzēt visam mikrobam vai atsevišķām tā ķermeņa daļām.
Bakterioskopijas praktiska pielietošana
To izmanto, lai diagnosticētu vairākas infekcijas slimības. Slavenākie no tiem ir tuberkuloze, gonoreja un recidivējošais drudzis. Turklāt viņi izmanto pētījumus, lai izpētītu visu orgāna vai produkta mikrofloras kompleksu. Taču kritiķi bieži norāda uz šīs metodes relatīvo neuzticamību un neprecizitāti.
Kultūras un baktēriju kultūru subkultūras
Veiciet tās, izmantojot Pastēra pipeti. Bakterioloģisko un citoloģisko izmeklēšanu bieži ir grūti veikt bez inokulācijas un subkultūras darbplūsmas laikā. Strādājot ar Pasteur pipeti, tās uzgalisnorauj ar pinceti. Pēc tam pats instruments tiek izvadīts caur degļa liesmu un pēc tam ļauj atdzist. Starp citu, sējai var izmantot gan šķidru, gan cietu barības vielu barotni. Izvēli ietekmē tas, kādi bakterioloģiskās izpētes mērķi tiek sasniegti. Tajā pašā laikā ir jāievēro darba algoritms un drošības pasākumi. Tātad, strādājot ar šķidru barotni, ir jānodrošina, lai tā neizšļakstītos un nesaslapinātu korķa un mēģeņu malas. Ja pētījumu veic ar cietu materiālu, kultūrā ievadīšanai bieži izmanto īpašu adatu. Veicot sēšanu un atkārtotu sēšanu, tie jāveic gāzes degļa liesmas tuvumā. Eksperimenta tīrības labad mēģene nedrīkst palikt atvērta ilgu laiku. Kas attiecas uz instrumentu ar kultūru: jums jāpārliecinās, ka tas nekam nepieskaras. Tāpat bakterioloģiskās izpētes tehnika paredz mēģenes malu apdedzināšanu pirms tās aizvēršanas. Gatavais produkts jāparaksta uzreiz pēc izgatavošanas, lai izvairītos no turpmākas neskaidrības.
Sējas efektivitāte
Tiek uzskatīts, ka šī metode ļauj iegūt precīzākus un ticamākus datus bakterioloģiskās diagnostikas laikā nekā iepriekš aplūkotā bakterioskopija. Šajā gadījumā darbību algoritms ir šāds:
- Sākotnēji uz barotnes virsmas uzsmērē tīrkultūru, ko ielej Petri trauciņā.
- Pirmā sēja jāveic sugai labvēlīgos apstākļosmikroorganismi.
- Pēc dienas vai divām optimālas vides klātbūtnē visas piemērotās kolonijas pārvietojas tur, kur tās var maksimāli attīstīties. Tādējādi tie tiek atbrīvoti no svešas mikrofloras.
Gala rezultāts ir viendabīgu baktēriju kultūra, ko var identificēt.
Tīrkultūras
Bet kā tie tiek izgatavoti? Šim nolūkam tiek izmantotas bioloģiskās un mehāniskās metodes. Pirmajā gadījumā lielu lomu spēlē uzturvielu barotnes, kur ir nepieciešamie apstākļi, kas ir labvēlīgi konkrētas kultūras attīstībai. Šo pieeju var izmantot arī tad, ja inficējas laboratorijas dzīvnieki, kas ir uzņēmīgi pret noteikta veida baktērijām. Mehāniskās metodes pamatojas uz sterila instrumenta izmantošanu, ar kuru kultūru ievieto uzturvielu barotnē, kas atrodas pirmajā, otrajā un trešajā Petri trauciņā. Tad jāgaida, kamēr izaugs atsevišķas kolonijas, un no tām jau izcelsies tīrkultūra. Baktērijas var audzēt arī īpašos termostatos, kur temperatūra tiek uzturēta noteiktā līmenī (parasti aptuveni 37 grādi). Šajā gadījumā process turpinās apmēram dienu. Bet atkarībā no mikroorganismu veida var noteikt citus terminus. Svarīga ir arī nepieciešamās skābekļa koncentrācijas klātbūtne. Lai to izdarītu, izmantojiet dažādas aerācijas metodes. Līdz šim mēs runājām par situāciju kopumā un kopumā, bet tagad pievērsīsim uzmanību tam, kāda ir bakterioloģiskās izpētes shēma.
Prakse
Lai atklātu patogēnos mikroorganismus pacienta vai potenciālā nesēja organismā, bieži izmanto metožu kopumu. Izmantotie materiāli un metodes ir atkarīgi no analīzes mērķiem, kā arī no vides apstākļiem, kurā tiek veikts darbs. Praksē visbiežāk baktērijas tiek atklātas ar asins kultūrām, kas ņemtas no cilvēka vai dzīvnieka. Ja lokālie bojājumi ir labi definēti, patogēnus var meklēt problemātiskajās zonās. Tas ir raksturīgi tādām slimībām kā dizentērija, gonoreja, difterija un daudzām līdzīgām slimībām. Īpaši smagos gadījumos šis process tiek sadalīts atsevišķos bakterioloģiskās izmeklēšanas posmos (kas raksturīgs vēdertīfam). Katrs no tiem izmanto savas metodes, kuru mērķis ir atrast infekcijas cēloni. Sīkāk aplūkosim situāciju ar vēdertīfu. Pirmajā slimības nedēļā visdrošākais veids, kā diagnosticēt slimību, ir asins kultūras. Otrajā gadījumā par tādu tiek uzskatīts seroloģiskais pētījums. Trešajā nedēļā tiek pārbaudīti izkārnījumi. Pēdējā metode tiek uzskatīta par atveseļojošo pacientu pārbaudi.
Mikroorganismu identifikācija
Tas sākas ar krāsošanas procesu. Tad viņi skatās, kā baktērija var sadalīt ogļhidrātus, aminoskābes utt. Turklāt šo procesu var papildināt ar citu īpašību izpēti, kas piemīt katrai atsevišķai mikroorganismu ģints vai sugai. Kā piemēru jāmin dažādu dzīvnieku eritrocītu šķīdināšanas iespējas, ietekme uz asins plazmas koagulāciju un trombu šķīdināšanu.fibrīns un tā tālāk. Tas viss ir atsevišķu mikropasaules pārstāvju atšķirīgās iezīmes. Seroloģisko identifikāciju var izmantot arī galīgajai atpazīšanai (bet parasti tas attiecas uz patogēnām baktērijām, kas pieder pie zarnu saimes).
Secinājums
Jāatzīmē, ka vairākus mikroorganismus nevar identificēt ar rakstā aprakstītajām metodēm. Šajā gadījumā plaši tiek izmantota laboratorijas dzīvnieku inficēšanas prakse. Aprēķins veikts, ņemot vērā faktu, ka parādīsies raksturīga toksicitāte vai patogenitāte, kas mākslīgos apstākļos netiek novērota. Infekciju var izmantot arī kā metodi patogēno mikrobu uzkrāšanai. Un jau tad, kad tiek salīdzinātas pētāmās kultūras īpašības, kas konstatētas bioloģisko, morfoloģisko, seroloģisko un bioķīmisko īpašību izpētes procesā, var teikt, ka ir zināms, ar kādiem mikrobiem mums ir darīšana. Identifikācija nozīmē baktēriju ģints, sugas un veida norādi. Ja pētāmais mikroorganisms noteiktās īpašībās atšķiras no tā tipiskā rakstura, tad tas ir jānorāda. Vairāki eksperti uzskata, ka šādos gadījumos būs lietderīgi no jauna identificēties, dublējot visas izmantotās metodes un paņēmienus. Dažreiz pētniecību var pārcelt uz nākamo līmeni, kas prasa nopietnāku (un dārgāku) pieeju. Ja tika iegūti negatīvi rezultāti, tas norāda, ka preparātsmikroorganismu nebija vai tie nebija dzīvotspējīgi. Bet pētījuma precizitātei, ja ir aizdomas par vairākiem baciļu nēsātājiem (dizentērija, difterija, vēdertīfs), šādos gadījumos tiek parādītas atkārtotas pārbaudes. Tas nepieciešams, lai speciālistiem būtu precīzs priekšstats par to, ar ko viņiem jāsaskaras.
